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TUhjnbcbe - 2021/1/12 17:36:00
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合成培养基,亦称综合培养基。是指根据目标培养物所需营养物质的种类和数量,精确设计并由已知成分的纯化学药品人工配制而成的,可精确掌握各成分性质和数量的一类培养基。一般用于研究微生物的形态、营养代谢、分类鉴定、菌种选育、遗传分析等。常用的合成培养基有培养细菌的葡萄糖铵盐培养基,培养放线菌的高氏1号培养基,培养真菌的查氏培养基等。

合成培养基(syntheticmedium),又称为组合培养基,是通过顺序加入准确称量的高纯度化学试剂与蒸馏水配制而成的,其所含的成分(包括微量元素在内)以及他们的量都是确切可知的。合成培养基一般用于实验室中进行的营养、代谢、遗传、鉴定和生物测定等定量要求较高的研究。

代表培养基高氏1号(淀粉硝酸钾)培养基

常用于培养、分离放线菌。

高氏一号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。如果加入适量的抗菌药物,则可用来分离各种放线菌。

成分:

可溶性淀粉=20g

KNO3=1g

NaCl=0.5g

K2HPO4·3H2O=0.5g

MgSO4·7H2O=0.5g

FeSO4·7H2O=0.01g

琼脂=15~20g

蒸馏水=mL

pH7.2~7.4。

制法:配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒人煮沸的水中,电磁炉加热,边搅边加人其他成分,溶化后,补足水分至mL,分装三角瓶后,0.1MPa灭菌15~20min。

配制时,先用少量冷水,将淀粉调成糊状,倒入少于所需水量的沸水中,在火上加热,边搅拌边依次逐一溶化其他成分,溶化后,补足水分到ml,调pH,℃灭菌20min。高温灭菌后,倒平皿前加入10%酚2滴至ml培养基中混匀,将培养基倒入平皿内约15ml/皿。

1、称量和溶化按配方先称取可溶性淀粉,放入小烧杯中,并用少量冷水将淀粉调成糊状,再加入少于所需水量的沸水中,继续加热,使可溶性淀粉完全溶化。然后再称取其他各成分,并依次溶化,对微量成分FeSO4.7H2O可先配成高浓度的贮备液,按比例换算后再加入。待所有试剂完全溶解后,补充水分到所需的总体积。配制固体培养基时,将称好的琼脂放入已溶的试剂中,在加热融化,最后补充所损失的水分。

2、调pH用试纸测培养基的原始PH,如果偏酸,用滴管向培养基中加入1mol/LNaOH,边滴边搅拌,并随时用pH试纸测其pH,直至pH达7.6。反之,用1mol/LHCI进行调节。

3、分装和加塞将配制的培养基分装入试管内,在试管口或锥形瓶口上塞上棉塞。

4、包扎加塞后,将全部试管用麻绳捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,其外再用一根麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。

5、灭菌将上述培养基以0C,20min,0.MPa高压蒸汽灭菌。

6、搁置斜面将灭菌的试管培养基冷却至C左右,将试管口端搁在玻璃棒上。斜面的斜度要适当,使斜面的长度约为管长1/3。

7、无菌检查将灭菌培养基放入C的培养箱中培养24~28h,以检查灭菌是否彻底。和改良的差别就在于有没有FeSO4·7H2O高氏常常配完后变成褐色也是由于Fe2+氧化为Fe3+的关系,所以常常有人用螯合的FeSO4,防止氧化。

察氏培养基

该培养基主要用于真菌的培养。常用于青霉,曲霉鉴定及保存菌种用。另外为了防止杂菌生长,时常在该培养基内加入高浓度的氯化钠,以抑制非真菌的生长,此时称之为高盐察氏培养基。

成分:

硝酸钠=3g

磷酸氢二钾=1g

硫酸镁(MgSO4·7H2O)=0.5g

氯化钾 =0.5g

硫酸亚铁=0.01g

蔗糖=30g

琼脂=15~20g

蒸馏水=mL

pH=7.0~7.2。

加热溶解,分装后,0.1MPa,℃灭菌15~20min。

注:察氏培养基又称蔗糖硝酸钠培养基,蔗糖可用葡萄糖而成葡萄糖硝酸盐培养基。

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